【摘 要】
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构建瑟氏泰勒虫P33和牛白介素18复合基因，为制备含有免疫佐剂的瑟氏泰勒虫亚单位疫苗和DNA疫苗奠定基础.根据GenBank上发表的瑟氏泰勒虫p33基因序列和牛白细胞介素18基因
【机 构】
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延边大学农学院,吉林,延吉 133002
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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构建瑟氏泰勒虫P33和牛白介素18复合基因，为制备含有免疫佐剂的瑟氏泰勒虫亚单位疫苗和DNA疫苗奠定基础.根据GenBank上发表的瑟氏泰勒虫p33基因序列和牛白细胞介素18基因序列分别设计两对特异性引物，分别以全血基因组DNA和pMD-18-T-IL-18质粒为模板，通过PCR获得2段目的片段，再用SOE-PCR技术构建IL-18-p33复合基因，将其克隆到pMD-19-T simple克隆载体，经PCR、BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和测序鉴定获得pMD-19T-IL-18-p33.再将IL-18-p33复合基因亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体，并转化至大肠杆菌表达菌种BL21中用IPTG诱导表达，收集表达产物进行SDS-PAGE和Westem blot分析.结果表明，成功构建IL-18-p33复合基因，该目的基因在大肠杆菌表达菌种BL21中成功获得表达，表达产物被瑟氏泰勒虫阳性血清所识别.本研究结果为今后制备瑟氏泰勒虫亚单位疫苗和DNA疫苗奠定了基础.
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